该讲义概述了神经胶质细胞的一般特点，较详细，希望对大家有所帮助！神经胶质细胞(neuroglial cell)又称胶质细胞(glial cell)，是神经组织中除神经细胞以外的另一大类细胞，其数量为神经细胞的10-50倍，而总体积与神经细胞的总体积相差无几(神经细胞约占45％，神经胶质细胞约占50％)。在常规的神经组织切片中，通常神经胶质细胞的体积比神经细胞小，直径为8-lO mm，和最小的神经细胞的直径相似。神经胶质细胞的一般特征和功能一）分类中枢; 星形胶质细胞（astrocyte) 大胶质细胞（macroglia） 纤维性星形胶质细胞 原浆性星形胶质细胞 少突胶质细胞（oligodendrocyte]小胶质细胞（microglia）、管周膜细胞（ependymal cell）、 脉络丛上皮细胞；Bergman胶质细胞、米勒细胞、垂体细胞 和伸展细胞等周围 神经膜细胞（Schwann cell，雪旺细胞） 卫星细胞（satellite cell ）胶质细胞与神经细胞都起源于胚盘外胚层神经上皮组织(小胶质细胞可能起源于中胚层)，其中的胶质母细胞发育成大胶质细胞和脉络丛上皮细胞，围绕神经管腔表面的部分神经上皮细胞分化成室管膜和脉络丛上皮细胞，神经母细胞发育成为神经细胞；神经嵴则分化为外周神经系统的胶质细胞。 （二）形态特点 胶质细胞与神经细胞一样也具有细胞突起，但其胞质突起不分树突和轴突。它与神经细胞不同，可终身具有分裂增殖的能力。常规染色标本上只能看到细胞核，用现代免疫细胞化学方法可在光镜下观察胶质细胞的整体形态，电镜下可发现在胶质细胞之间存在着低电阻通路的缝隙连接(gap junction)。(一)星形胶质细胞 星形胶质细胞是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞，也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形，从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板(footplate)或称终足(endfoot)，有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上(图1-2)，因此这些脚板又被称为血管足或血管周足，靠近脑脊髓表面的脚板则附着在软膜内表面，彼此连接构成胶质界膜(glia limitans)。 在用尼氏法等一般染色组织切片中，星形胶质细胞的核比其他胶质细胞的核大，呈圆形或卵圆形，常染色质多，异染色质少而分散，故染色浅，核仁不明显。胞质中没有尼氏体，但具有一般的细胞器。胞质中含有大量交错排列的原纤维，伸人到胞突中并与胞突平行行走，是构成细胞骨架的主要成分。原纤维的超微结构是一种中间丝，称为胶质丝(glial filament)，其直径介于微管(25μm)和微丝(6μm)之间，由相对分子质量为47000—50000的蛋白质组成，此类蛋白质被称作为胶原原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein，GFAP)。利用细胞免疫法证明GFAP仅存在于星形胶质细胞的胞体中，因此可利用GFAP的特异性抗体来检测星形胶质细胞。 根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种：纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质，突起细长，分支较少，胞质中含大量胶质丝，又称蜘蛛细胞(spider cell)；原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte)，多分布在灰质，细胞突起粗短，分支多。胞质内胶质丝较少，又称苔状细胞(mossycell)。电镜下星形胶质细胞的胞核有缺刻，胞质较清亮，游离核糖核蛋白体和粗面内质网均很少，糖原颗粒丰富，有大量的胶质丝。纤维形星形胶质细胞的突起呈长圆柱形，而原浆性星形胶质细胞的突起呈薄片状，并常包裹着神经细胞及其突触(不伸人突触间隙)。星形胶质细胞的脚板与血管内皮细胞之间相隔一层基板，脚板质膜与基板接触处有半桥粒结构。 相邻星形细胞之间以及相邻脚板之间有缝隙连接。星形胶质细胞之间的细胞间隙狭窄，仅约3nm，内含组织液。缝隙连接又称缝管连接或接合膜(nexus)，是由大量连接小体(connexon)有规律地成平板状排列的连接。每个连接小体又由6个亚单位镶嵌蛋白组成，这种蛋白被称为连接蛋白或接合素(connexin)。连接小体的中央有一中央小管(centralcanaliculum)通连相邻细胞。星形胶质细胞之间的缝隙连接主要由接合素43(CX43)构成。而少突胶质细胞的缝隙连接由CX32构成。 星形胶质细胞比脑内其他任何类型的细胞具有更广泛的缝隙连接，由此使得星形胶质细胞类似于合胞体样结构。这种缝隙连接的功能为：加强相邻细胞的连接；细胞通讯，其方式为离子偶联以及代谢物偶联。离子偶联即电偶联，可使细胞形成同步活动。而代谢偶联则能使单糖、氨基酸、核苷酸、维生素以及激素和其他一些低分子物质自由通过缝隙连接。 除上述典型的星形胶质细胞外，还有几种特殊类型的星形胶质细胞。如小脑的伯格曼胶质细胞(Bergman glial cell)；视网膜的米勒细胞(Muller glial cell)，又称放射状胶质细胞(radial neuroglia cell)；脑垂体的垂体细胞和正中隆起等处的伸展细胞(tanycyte)。(二)少突胶质细胞 在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈串珠状，故被称之为少突胶质细胞，但是现在用特异性免疫细胞化学染色显示的少突胶质细胞，其突起并不少，而且还有许多分支。根据少突胶质细胞的分布和位置可分为三种：①束间少突胶质细胞(interfasicular oligodendrocyte)，分布在中枢神经系统的白质的神经纤维束之间，成行排列，在胎儿和新生儿时期含量较多，而在髓鞘形成过程中迅速减少。②神经细胞周少突胶质细胞(perineuronal oligodendrocyte)，分布在中枢神经系统的灰质区，常位于神经细胞周围，与神经细胞的关系密切，故又称为神经细胞周卫星细胞(perineuronal satellite cell)，但在神经细胞胞体与此类细胞之间亦常有星形胶质细胞的薄片状突起分隔。这类细胞亦能形成灰质内神经纤维的髓鞘。 ③血管周少突胶质细胞(pcrivascular oligodendrocyte)。主要分布在中枢神经系统内的血管周围。电镜观察少突胶质细胞染色较深，核圆而小，色深，异染色质较多。细胞质较少，但有大量的游离核糖体、高尔基复合体、粗面内质网和线粒体。少突胶质细胞所含的胶质丝和糖原较星形胶质细胞少，但有较多的微管，因此在电镜下可根据胶质丝和微管的含量来区别星形胶质细胞和少突胶质细胞。此外少突胶质细胞表面膜上含有半乳糖脑苷脂(galactocerebroside，GC)，也是髓鞘的一种主要类脂，用GC单克隆抗体可鉴别少突胶质细胞。根据电镜下少突胶质细胞的不同致密度和胞核异染色质聚集情况的差异，可将少突胶质细胞分为亮型、中间型和暗型。其中亮型少突胶质细胞分裂最活跃，并很快分化为中间型细胞，故其数量最少；中间型的少突胶质细胞逐渐成熟而转变成暗型，所以暗型少突胶质细胞数量最多，中间型数量居中。(三)小胶质细胞 用碳酸银浸镀法显示的小胶质细胞是中枢神经系统中最小的一种胶质细胞。细胞体呈细长或椭圆，从胞体发出细长而有分支的突起，表面有许多小棘突。常规染色见核细长或三角形，染色较深。电镜下小胶质细胞染色深，核扁平或锯齿状，胞质内溶酶体较多。小胶质细胞数量少，约占全部胶质细胞的5％。此细胞是定居在脑内的吞噬细胞，在炎症刺激下，其抗原性增强，形态伸展，功能活跃。小胶质细胞在脑内各部分均有分布，在灰质中的数量比在白质中的多5倍。海马、嗅叶和基底神经节的小胶质细胞比丘脑和下丘脑的多，而脑干与小脑中最少。对小胶质细胞的起源尚有争议，主要存在两方面的意见：①起源于中胚层，包括起源于脑膜中胚层，毛细血管壁的周细胞(pericyte)或血循环中的单核细胞；②起源于外胚层，认为脑室室管膜附近有一些幼稚且具有变形运动能力的细胞，称阿米巴样小胶质细胞(ameboidmicroglia)，是小胶质细胞的前身。室管膜及室管膜下层都是胚胎时期神经管壁的结构部分，因此认为小胶质细胞起源于神经外胚层。 Ling(1981年)的实验证明，小胶质细胞起源于血循环中的单核细胞，后者进入发育中的中枢神经系统后转变成具有吞噬能力的阿米巴样小胶质细胞。阿米巴样小胶质细胞在吞噬中枢神经系统内一些自然退变的残余物，同时进行繁殖。至中枢神经系统发育完成后，它们变成静止小胶质细胞。当中枢神经系统损伤时，静止小胶质细胞被激活成巨噬细胞，与血循环浸入的单核细胞一齐吞噬碎片和退化变性的髓鞘。当损伤痊愈后，它们又恢复为小胶质细胞。在尼氏法与HE染色切片中其形状常有变异，这主要与其进行运动及吞噬异物有关。三、电生理特性 (一)膜电位 神经胶质细胞的膜电位变化缓慢，惰性大，故称惰性静息电位。它比相应的神经元膜电位大。神经胶质细胞膜电位几乎完全取决于细胞外K+浓度，Na+、Cl-浓度的改变不能使静息电位发生明显改变。因为神经胶质细胞的细胞膜仅对K+有通透性，而对其他离子则完全不通透，故静息电位完全取决于K+扩散平衡电位。 (二)去极化与复极化 神经胶质细胞接受电刺激或机械刺激后不会发生动作电位，虽有去极化(约40mV)与复极化，但无主动的再生式电流产生。电流仅随电压按比例变化，而膜电阻不变。它不能像神经元的冲动那样传导，不是膜兴奋性质的表现，其离子通透性并未变化。(三)神经胶质细胞间的连接 所有神经胶质细胞间均有缝隙连接。蛙、水蛭、蝾螈和组织培养的哺乳类动物的缝隙连接都是电偶合，电偶合有助于细胞内可能发生的离子不平衡的恢复，且可能有代谢上的相互作用(代谢偶合）。当一些神经胶质细胞由于K+增加而发生去极化，而另一些神经胶质细胞则未发生这种变化时，两者间即有电位差，低电阻偶合对于神经胶质细胞间的电流传导是必需的，这种电流可被细胞外电极在组织表面引导出来。 胶质细胞与其神经元之间是否存在类似突触样的连接也引起人们的重视。有作者用免疫电镜观察到大鼠的脑垂体中有GABA、脑啡肽和P物质免疫反应阳性神经元末梢与胶质细胞形成突触样结构。表明至少有部分胶质细胞的活动受神经支配，它们的细胞膜表面必然存在着与其神经递质相对应的受体。四、星形胶质细胞的受体 许多实验证明星形胶质细胞具有多种神经递质的受体，如乙酰胆碱受体、多巴胺受体、肾上腺素受体、5—羟色胺受体以及一些神经肽受体。因此神经元兴奋释放的神经递质同样引起胶质细胞产生复杂的生理效应。星形胶质细胞是中枢神经系统中主要的糖原储存细胞，当细胞膜上的b肾上腺素受体与其配体结合后，可激活腺苷酸环化酶，产生第二信使cAMP，促使细胞内储存的糖原分解为葡萄糖，以供神经元利用。星形胶质细胞膜上的a1肾上腺素受体兴奋后可引起磷酸肌醇分解，产生1，4，5三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油(DAG)。前者控制胶质细胞内钙的运转，后者激活蛋白激酶C(PKC)。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)与星形胶质细胞膜上相应受体结合后可加速磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol)的水解，激活与生长因子有关的生化信使系统。谢谢主任，我会加倍努力！正好做这方面的研究，补充几点，主要就小胶质细胞在帕金森病中的作用谈开，望能得到同行战友的指点！1、 帕金森病是一种常发生于中老年人的神经系统变性疾病。至今帕金森病发病原因和机制尚不完全清楚。小胶质细胞是中枢神经系统的免疫反应细胞，激活的小胶质细胞可生成释放自由基等毒性物质。黑质多巴胺能神经元更易受到激活的小胶质细胞所介导的损害。最近的研究表明，小胶质细胞激活可能参与了多巴胺能神经元选择性变性，同时也可能具有保护作用。2、帕金森病有一个炎症变化过程。神经系统诸多疾病损伤机制的共同特征是炎症。小胶质细胞激活、大量增殖是中枢神经系统疾病炎症反应的一个最重要表现。帕金森病患者，在黑质纹状体有大量的小胶质细胞被激活、增殖，尤其黑质更显著；小胶质细胞的激活、增殖先于多巴胺能神经元变性，其高峰也先于多巴胺能神经元变性的高峰。小胶质细胞被激活后释放多种细胞因子及神经营养因子，引起各种不同程度的炎症反应和细胞凋亡构成的“病理级联”变化和保护作用。因此，在神经系统，小胶质细胞具有损害和保护的双重作用。3、当环境因素选择性作用于黑质纹状体，小胶质细胞被激活、增殖，产生自由基、超氧化物阴离子、一氧化氮、肿瘤坏死因子 、白细胞介素、前列腺素、神经生长因子等多种物质，导致黑质多巴胺能神经元变性、坏死。小胶质细胞激活在帕金森病发病机制中所起的重要损害作用，是通过以下途径产生的：氧化应激，兴奋毒性，胶质源性神经生长因子的损害，免疫、机械吞噬损害作用，细胞因子损害作用等！4、以往认为中枢神经系统的炎症反应是有害的，但近年来的研究表明，在中枢神经系统，炎症反应也有有利的一面，甚至具有神经保护作用。神经系统和免疫系统之间具有双向信息交流的“共同语言”，激活的小胶质细胞所产生的神经营养因子有利于神经系统和免疫系统之间的直接双向信息交流 。在帕金森病，小胶质细胞的激活在本质上是对有害因素做出的反应，具有保护作用。小胶质细胞减轻多巴胺能神经元变性，是通过以下途径来实现的：抗氧化酶、清除兴奋性毒性、神经生长因子等。5、从目前的研究来看，对于小胶质细胞的看法几乎是相互矛盾的，但并不是不可理解的，正如炎症本身在肌体中的地位一样，它也是一个双刃剑。在不同的条件、不同的时期，发挥其保护或者损伤作用。而目前的研究重点则是如何来把握这个度，避免或者利用这种损伤或保护作用！"精上添花"一下！既然谈到了小胶质细胞，又怎么少得了星形胶质细胞呢？与小胶质细胞相同，星形胶质细胞在中枢神经退行性疾病中的作用也存在着损伤和保护两个方面；但是不同的是，对其保护的一面强调的更多一些。1、不论在神经退行性疾病还是急性脑损伤中，谷氨酸的兴奋性毒性作用都是重要的损伤因素。在这其中，星形胶质细胞发挥着至关重要的作用。如通过钠离子依赖的谷氨酸转运体对谷氨酸摄取的调节、通过对GABA、Glycine和D-Serine的调节间接影响着神经原谷氨酸受体功能以及通过调节胞外钾离子的浓度从而影响微环境等等。由于谷氨酸转运体的活动是一个强烈耗能的过程，因此当细胞供能不足时(缺血缺氧)，将会导致星形胶质细胞谷氨酸的释放，造成毒性作用。2、星形胶质细胞能够产生促红细胞生成素，抑制Caspase-9，增加Bcl-2家族抗调亡因子的释放，同时也能激活JAK-2通路和NF-γB、HIF-1等，从而减少神经元的死亡。3、星形胶质细胞含有远大于神经元的GSH及其合成代谢相关的酶。而GSH是脑内主要的抗氧化物质。由星形胶质细胞合成和产生的GSH在保护神经元免受反应氧族损伤的过程中发挥着关键性的作用。4、最近的研究表明，星形胶质细胞在脑内的水盐代谢中也发挥着重要作用。由于脑内细胞间隙体积较小，因此含水量的微小改变，能对渗透压产生巨大作用，其意义不言而喻。5、星形胶质细胞释放的神经营养因子是神经元生长和发育的重要物质。6、但是，和小胶质细胞相同，星形胶质细胞也能产生iNOS、TNF和白介素等炎症因子，对周围环境造成影响。 我接下去的课题就和星形胶质细胞直接相关。希望和有兴趣的战友们共同探讨。请问您做星形胶质细胞培养么。你用什么方法纯化呢？提供一种星型胶质细胞的纯化培养方法:1．  分离大鼠胚胎（16-18周）新皮层，置于L-15（或Hank’s平衡盐/DMEM溶液，无Hepes）培养基中，除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层组织。2．  用解剖刀将其切成1mm3大小的组织块。3．  用1ml枪头转移250μl胶原酶储存液（1.33%，溶于L-15中）到1ml的L-15（或D-MEM）中。每2只鼠脑组织块使用1-1.5ml稀释胶原酶液。4．  37℃水浴中孵育30min.5．  1000rpm(大约230g)中离心5min，或3000rpm(大约2000g)中离心1min。6．  去上清。7．  在含EDTA-CMF的溶液中重悬细胞，并与胰蛋白酶以1：4～1：10比例混合。可以根据观察到的细胞消化的情况，适当调整两者的比例。8．  加入胰蛋白酶的抑制剂和DNase溶液，混合5分钟。9．  1000rpm(大约230g)中离心5min，或3000rpm(大约2000g)中离心1min。10．去上清。加入500μl D-MEM-BS。11．轻轻吹打成单细胞悬液，开始用5ml枪头吹打10次，在需要时用18-gauge的针头吹打。( 注意：不要产生气泡。）200目/300目尼龙网过滤。12．将细胞转移到含10